"Como todos sabemos, a PCR é un método experimental básico nos laboratorios bioquímicos". Os resultados experimentais son sempre insatisfactorios, o que pode deberse a unha lixeira contaminación dos consumibles plásticos de PCR ou a interferencias experimentais causadas pola introdución de inhibidores. Hai outro motivo moi importante: a selección incorrecta dos consumibles tamén terá un gran impacto nos resultados experimentais.
Hai moitas razóns que afectan os resultados dos experimentos de PCR: normalmente hai os seguintes 7 tipos.
1. Cebadores: os cebadores son a clave da reacción específica da PCR, e a especificidade dos produtos da PCR depende do grao de complementariedade entre os cebadores e o ADN molde;
2. Encima e a súa concentración;
3. A calidade e concentración de dNTP;
4. Modelo (xene obxectivo) ácido nucleico;
5. Concentración de Mg2+;
6. Axuste de temperatura e tempo;
7. Número de ciclos;
8. Equipos, consumibles, etc.
Entre os moitos factores que inflúen, os consumibles son un dos factores moi importantes e fáciles de pasar por alto.
Hai moitos tipos de
Consumibles de PCR: 8 tubos, tubos de baixo volume, tubos estándar, sen faldón, semifaldón, faldón completo e unha serie de placas de PCR e qPCR. É moi difícil escoller, e hai moitos problemas comúns, vexamos os problemas que escolle cada un
Consumibles de PCR, e como resolvelos?
Por que son
Consumibles de PCRxeralmente feito de PP?
Resposta: os consumibles PCR/qPCR están feitos xeralmente de polipropileno (PP), porque é un material bioloxicamente inerte, a superficie non é fácil de adherir ás biomoléculas e ten boa resistencia química e tolerancia á temperatura (pódese esterilizar en autoclave a 121 graos) bacterias e tamén pode soportar cambios de temperatura durante o ciclo térmico). Estes materiais adoitan estar en contacto directo con reactivos ou mostras, polo que durante o proceso de produción e preparación hai que seleccionar materiais de alta calidade e boas técnicas de procesamento.