Introdución básica
O lisado de eritrocitos é un dos métodos máis sinxelos e sinxelos para eliminar os glóbulos vermellos, é dicir, dividir os glóbulos vermellos con lisado, que non dana as células nucleadas e pode eliminar completamente os glóbulos vermellos. A escisión do lisado é un método suave de eliminación de glóbulos vermellos, que se usa principalmente para a separación e purificación de células do tecido dispersas pola dixestión enzimática, a separación e purificación de linfocitos e a eliminación de glóbulos vermellos nos experimentos de proteínas de tecidos e nucleicos. extracción ácida. As células do tecido obtidas polo lisado de glóbulos vermellos non conteñen glóbulos vermellos, podendo empregarse ademais para cultivo primario, fusión celular, citometría de fluxo, separación e extracción de ácidos nucleicos e proteínas, etc.
Instrucións de uso
Mostra de células do tecido
1. Os tecidos frescos foron dixeridos polo páncreas/enzima ou colaxenase e dispersáronse nunha suspensión celular única, e o sobrenadante foi descartado por centrifugación.
2. Tome o lisado ELS da neveira a 4â, engade o lisado ELS ao precipitado celular nunha proporción de 1:3-5 (engade 3-5 ml de lisado a 1 ml de células compactadas), sopra suavemente e mestura.
3. Centrifugue a 800-1000 rpm durante 5-8 minutos e descarte o líquido transparente vermello superior.
4. A parte precipitada foi recollida e centrifugada con solución de Hank ou solución de cultivo sen soro durante 2-3 veces.
5, se a rachadura non está completa ou completa pódese repetir os pasos 2 e 3.
6. Células de resuspensión para experimentos posteriores; Se se extrae ARN, o mellor é facelo na solución preparada a partir do paso 4 usando auga DEPC
Os glóbulos vermellos teñen un ciclo de vida moi curto, só 120 días, pero reproducen o sangue moi rapidamente, e neste caso son especialmente capaces de dividirse celularmente, e son as células que se dividen máis rápido de todas, polo que esta célula é moi valiosa. polo que é moi útil para o cultivo celular. É moi sinxelo, non ten ningún orgánulo, só membranas celulares e proteínas.