> Blog > Noticias da industria

Cales son as funcións do kit ELISA?

2022-12-23

O kit ELISA baséase na fase sólida do antíxeno ou anticorpo e na etiquetaxe enzimática do antíxeno ou anticorpo. O antíxeno ou anticorpo unido á superficie do vehículo sólido aínda conserva a súa actividade inmunolóxica, e o antíxeno ou anticorpo marcado con encima mantén tanto a súa actividade inmunolóxica como a actividade enzimática. No momento da determinación, a mostra en proba (na que se mide o anticorpo ou antíxeno) reacciona co antíxeno ou anticorpo na superficie do portador sólido. O complexo antíxeno-anticorpo formado no vehículo sólido sepárase doutras substancias do líquido mediante lavado.

Engádense antíxenos ou anticorpos marcados con encimas, que tamén se unen ao vehículo sólido por reacción. Neste momento, a cantidade de encima na fase sólida é proporcional á cantidade de substancia no espécime. Despois de engadir o substrato da reacción enzimática, o substrato é catalizado polo encima para converterse en produtos coloreados. A cantidade do produto está directamente relacionada coa cantidade de substancia probada na mostra, polo que se pode realizar análise cualitativa ou cuantitativa segundo a profundidade da cor.

A alta eficiencia catalítica das encimas amplifica indirectamente os resultados da resposta inmune, facendo que o ensaio sexa moi sensible. O ELISA pódese usar para determinar antíxenos, pero tamén se pode usar para determinar anticorpos.

Principios básicos do kit ELISA
Usa a reacción específica do antíxeno e do anticorpo para conectar o obxecto ao encima, e despois produce unha reacción de cor entre o encima e o substrato para a determinación cuantitativa. O obxecto da medición pode ser anticorpo ou antíxeno.

Neste método de determinación son necesarios tres reactivos:
â Antíxeno ou anticorpo en fase sólida (adsorbente inmune)
â¡ Antíxeno ou anticorpo marcado con encimas (marcador)
â¢ substrato para a acción enzimática (axente de desenvolvemento da cor)

Na medición, o antíxeno (anticorpo) únese primeiro ao portador sólido, pero aínda conserva a súa actividade inmune, e despois engádese un conxugado (marcador) de anticorpo (antíxeno) e encima, que aínda conserva a súa actividade inmune e encima orixinal. actividade. Cando o conxugado reacciona co antíxeno (anticorpo) do portador sólido, engádese o substrato correspondente do encima. É dicir, hidrólise catalítica ou reacción REDOX e cor.

O ton de cor que produce é proporcional á cantidade de antíxeno (anticorpo) que se vai medir. Este produto de cor pódese observar a simple vista, microscopio óptico, microscopio electrónico, tamén se pode medir mediante espectrofotómetro (instrumento de etiquetado enzimático). O método é sinxelo, cómodo, rápido e específico.

Anterior:Presentación de Elisa Plate

A continuación:Por que o cultivo celular lisa primeiro os glóbulos vermellos?